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重組蛋白真核表達系統(tǒng)與原核表達系統(tǒng)的區(qū)別

  • 發(fā)布日期:2021-10-14      瀏覽次數(shù):2566
    •   重組蛋白真核表達系統(tǒng)與原核表達系統(tǒng)的區(qū)別
        重組蛋白真核表達采用原核表達系統(tǒng)進行研究,主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中,通過IPTG誘導(dǎo)和終純化獲得所需的目的蛋白。其優(yōu)點是可以在短時間內(nèi)獲得基因表達產(chǎn)物,所需成本相對較低。
        目前的表達系統(tǒng)各有利弊,但一般理想的表達系統(tǒng)滿足以下幾點:一是特異性,不受其他內(nèi)源性因素影響,只能通過外源性無毒物激活。二是不干擾,不干擾細(xì)胞通路。以及誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。
        因此,在選擇表達系統(tǒng)時,必須充分考慮各種因素,如蛋白質(zhì)性質(zhì)、實驗條件、生產(chǎn)成本、表達水平和安全性。權(quán)衡利弊后,選擇相應(yīng)的表達系統(tǒng)。
        原核表達系統(tǒng)與重組蛋白真核表達系統(tǒng)的區(qū)別:
        1.根本的區(qū)別是,原核表達系統(tǒng)的表達系統(tǒng)是原核細(xì)胞;真核表達系統(tǒng)在真核細(xì)胞如酵母細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞中表達。
        2.兩種表達系統(tǒng)都通過含有原核或真核啟動子和其他表達相關(guān)元件的質(zhì)粒系統(tǒng)表達外源基因。
        3.與真核表達系統(tǒng)相比,原核表達系統(tǒng)的表達效率易于優(yōu)化和調(diào)整,表達量高。然而,當(dāng)用于表達真核外源基因時,由于不同的蛋白質(zhì)折疊和糖鏈修飾,其應(yīng)用受到限制。真核表達系統(tǒng)的表達量相對較低。雖然酵母和昆蟲系統(tǒng)的表達量相對較高,但哺乳動物基因的表達也存在不足。
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